判斷原代細(xì)胞是否污染?需結(jié)合肉眼觀察、顯微鏡檢查與專項(xiàng)檢測，培養(yǎng)基渾濁、顏色變黃、鏡下可見快速運(yùn)動(dòng)的微小顆粒或絲狀菌絲是主要判斷依據(jù)。
一、肉眼觀察（初步判斷）
在換液或傳代前，首先觀察培養(yǎng)基狀態(tài)：
渾濁度：正常培養(yǎng)基清澈透明，若出現(xiàn)霧狀或乳白色渾濁，提示可能為細(xì)菌污染。
顏色變化：培養(yǎng)基由粉紅/紅色變?yōu)辄S色，說明pH下降，常見于細(xì)菌代謝產(chǎn)酸；少數(shù)真菌污染可能導(dǎo)致變紫。
沉淀或漂浮物：出現(xiàn)白色、黃色顆粒沉淀（細(xì)菌聚集）或?棉絮狀、絲狀漂浮物?（真菌菌絲），可直接判定污染。

二、顯微鏡觀察（精準(zhǔn)確認(rèn)）

在100–200倍倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞間隙和形態(tài)：
細(xì)菌污染：視野中可見大量微小桿狀或球狀顆粒，并在細(xì)胞間隙快速運(yùn)動(dòng)，細(xì)胞逐漸變圓、脫落。
真菌污染：可見絲狀菌絲、圓形孢子或棉絮狀菌落，菌絲常纏繞細(xì)胞，導(dǎo)致增殖停滯。
支原體污染：普通光學(xué)顯微鏡難以直接觀察（體積僅0.1–0.3μm），但可間接發(fā)現(xiàn)細(xì)胞?空泡增多、增殖緩慢、貼壁差?等異常狀態(tài)。
注意：支原體污染隱蔽性強(qiáng)，若細(xì)胞長期生長不良但無明顯微生物跡象，建議使用?PCR或熒光染色法進(jìn)行專項(xiàng)檢測。